『幕末尽忠報国烈士伝MIBURO』（ばくまつじんちゅうほうこくれっしでんみぶろ）は、inre（インレ）が2017年12月22日に発売したWindows用アダルトゲーム。
幕末を舞台に新撰組を主題として描かれた作品であり、近藤勇や土方歳三を始めとして登場人物たちのほとんどが女性化されている。久坂玄瑞や勝海舟、清川八郎、田中新兵衛、佐々木愛次郎、佐伯又三郎など女性化していない登場人物もいる。
ストーリー 幕末期、幕府大老の井伊直弼がアメリカ合衆国と日米修好通商条約を結んだことや安政の大獄により桜田門外の変が勃発。京には尊王攘夷を目論む志士たちや不逞浪士が殺到、治安は悪化した。幕府は治安維持を目的に京都所司代の上役として京都守護職を設置。京に上洛した薩摩藩の要求により将軍徳川家茂が上洛することになるが、京の治安を不安視した一橋慶喜侯および松平春嶽は守護職を会津藩の松平容保に依頼。容保は文久2年(1862年)に守護職に就任する。
文久3年(1863年)、密かに倒幕を目指す庄内藩出身の志士・清河八郎は江戸近辺の剣術道場や罪人から剣客を集めて「浪士組」を結成し、将軍警護を名目に上洛するが、京で尊王攘夷派に寝返ることを明かして江戸に戻ると述べる。これに反対して京に残ったのが芹沢鴨の一派と試衛館・近藤勇の一派である。浪士組の一員であり近藤とは知己であった佐々木只三郎は芹沢および近藤の一派を京都守護職である松平容保の支配下に置くことを計らい、以降京の浪士組は会津藩お預かりとなる。芹沢および近藤は屯所を壬生村に設置して「壬生浪士組」を名乗り、京の治安維持活動に乗り出す。
徳山藩を脱藩し、妹の鞘と共に京にやって来た見田健は、危うく不逞浪士に殺されかけるが、市中警備をしていた壬生浪士組の近藤勇、土方歳三、沖田総司、斎藤一に救われる。命からがら浪士の一人を殺害した健を見込んだ土方が彼を屯所に連れて行くところから物語は始まる。
登場人物 新撰組 見田健 声 - なし 主人公。「玉の力」という敵の弱点を見抜く能力を持つ。長州藩の支藩である周防国徳山藩の下級武士の家に生まれる。姉とその夫である義兄、妹の鞘と共に暮らしていたが、藩内の政争により義兄が謀殺され、お家は断絶となり姉を残して京に脱藩。京の長屋で生活していたが不逞浪士に襲われて鞘が手籠めにされかけてしまう。この火急の事態に刀を抜くと、玉の力により敵の首元に光の玉が浮かび上がるのを目撃し、そこを斬ることで浪士の一人を殺害する。しかし多勢に無勢か、集団で殺されかけたところに市中の巡回をしていた新撰組の近藤勇、土方歳三、沖田総司、斎藤一に救われる。屯所に連れて行かた後、近藤たちから入隊を勧められて見習いということで壬生浪士組に参加する。 たびたび行動を警告するような差出人不明の謎の文を受け取る。隊士たちから稽古を受け、藤堂平助との試合などを経て正式な隊士として認められるが、八月十八日の政変の後、壬生浪士組が新撰組と改められた直後に試衛館一派による芹沢鴨暗殺に遭遇してしまう。斬り合いに巻き込まれ血の海に横たわる鞘の姿を目撃し、我を失って芹沢を殺害。自身も負傷して意識を失うが、目覚めてからは鞘に関する記憶を一切失ってしまう。同時に冷徹に隊士の粛清などを行う人斬りとしての一面も垣間見せるようになる。 隊長格にも引けを取らぬ腕前に成長した後は副長付きの遊撃隊士として土方の側近となる。
近藤勇 声 - 一色ヒカル 局長。武州多摩出身。試衛館時代のメンバーおよび健などの親しい者からの愛称は「イサリン」。お嬢様言葉で喋り、武士道を重んじる。後に新撰組の後ろ盾となる会津中将こと松平容保を深く敬愛する。 百姓の生まれだが近藤周助の養子になり天然理心流四代目宗家を継ぐ。若先生として多摩の門弟たちに稽古を付けていた際に土方歳三と出会い、終生の友となる。試衛館にて同門として土方、沖田総司、井上源三郎、山南敬助、食客として永倉新八、原田左之助、斎藤一、藤堂平助らと過ごしていた。ある時幕府講武所の教授方に抜擢されるが、百姓の出身であることが露見して取り止めとなる。この一件から近藤と、とりわけ土方は武士として大成することに強い野心を抱く。 清川八郎が浪士組の隊士を募った際には山南からの紹介でこれに参加。試衛館の門人や食客たちと共に京に上洛する。清川が倒幕の先鋒として浪士たちを江戸に戻そうとした際には芹沢と共に京に残ることを選び、講武所の件から旧知であった佐々木只三郎の紹介で会津藩お預かりの身となる。 八月十八日の政変での功績が認められ、松平容保から新撰組の名を拝命する。その後も池田屋事件、禁門の変などと活躍。長州への征伐では広島で動向を探るなど多数の功を認められ、会津藩お預かりから幕臣に取り立てられる。 気を吐いていた新撰組だが、第二次長州征討での小倉の戦いでは大石内蔵助に敗北を喫する(「ChuSinGura46+1 -忠臣蔵46＋1- 武士の鼓動(A samurai's beat)」を参照)。また、伊東甲子太郎が御陵衛士として隊から分裂し、一連の騒動で藤堂を失うなど、新撰組の勢いは翳り始める。 大政奉還後の情勢不安の中で御陵衛士残党に狙撃され肩を負傷。大阪で沖田と共に療養することになる。鳥羽・伏見の戦いで旧幕府側は敗退。土方が指揮していた新撰組も大阪城に退転し、榎本武揚の軍艦で江戸に向かう。江戸では勝から甲州城を褒美に甲陽鎮撫隊として甲州勝沼の戦いに参加するが、新政府軍に敗れる。同時期、永倉たちを家臣として召し抱えるという近藤の言に反発し、永倉と原田が新撰組から離脱。 五兵衛新田に滞在した新撰組はそこで隊士を集めて調練を行う。途中有馬藤太の取り調べを受け、下総国流山に移動するが、直後に新政府軍に包囲され近藤が投降。土方らは脱出するものの、板橋で取り調べを受けた近藤は斬首される。 個別ルートでは流山で新政府軍に包囲された際、そこにかつて健が命を救った酒井兵庫が現れる。酒井は風貌が近藤に瓜二つであり、影武者として自らが身代わりになる。近藤の代わりに酒井が板橋で処刑され、近藤は健と共に江戸に潜伏することになる。明治に入り、函館で戦う土方が再び新撰組の居場所を作ってくれることを信じて待つが、函館政府が投降して土方が討ち死にしたことを知ると塞ぎ込む。函館戦争で新政府軍を指揮していた黒田清隆への復讐を目論むも、有馬藤太に諭されて失敗。死を望むようになるが、かつて敬愛した容保から正式に新撰組局長の任を解かれて健と共に生きることを決める。
土方歳三 声 - 和水きなこ 副長。武州多摩出身。親しい者たちからは「ひじりん」と呼ばれ、近藤からは親しみを込めて「歳さん」と呼ばれる。実家は豪農であり、石田散薬という薬を売り歩いて稼いだ。近隣の剣術道場を道場破りするなどの暴れん坊で、「バラガキ」と呼ばれ素行が荒かったが、近藤と出会った事で彼女に心酔。剣術の稽古を積むことになる。 近藤を侍大将にすることを目標にし、京に上洛後もその目的のために邁進する。浪士組では厳しい局中法度を制定して隊士たちを引き締めた。健が殺されかけながらも不逞浪士を斬っていることに着目し、屯所に連れて行って入隊の切っ掛けを作る。見習い中の健が平野国臣を追跡するなど勝手な行動を取った際には厳しく叱責して隊から追い出そうとするが、平助との試合で実力を示してからはとりわけ目をかけるようになる。 禁門の変の後で入隊した伊東甲子太郎を訝しみ、山南にその動向を探らせて隊を二つに割ろうとする目論みを崩そうとするが、結果的に山南の死を招いてしまう。また、長州征伐の小倉口の戦いでは堀部安兵衛に敗れる(「ChuSinGura46+1 -忠臣蔵46＋1- 武士の鼓動(A samurai's beat)」を参照)。 坂本龍馬や勝海舟の徳川家蝦夷移住計画に乗れば近藤が城持ち大名になれると踏み、密かに協力する。 大政奉還後は御陵衛士残党による襲撃で負傷した近藤に代わり、鳥羽・伏見の戦いで局長を代理して戦うが敗退。近藤と沖田が療養する大阪城に退転して榎本武揚の軍艦で江戸に向かう。甲州勝沼の戦いで敗北を喫した後に五兵衛新田、流山へと移転。流山で新政府軍の有馬藤太に包囲され、近藤を失う。 個別ルートでは旧幕府軍の大鳥圭介と合流し、宇都宮城の戦いで有馬藤太と対決。有馬に手傷を負わせるが自身も負傷。そのまま会津戦争へと参戦するも、会津は同盟諸藩に裏切られるなど形勢は不利のまま推移する。土方は仙台藩へ援軍を要請しに向かい、そこで旧幕府海軍指揮官の榎本武揚と出会う。仙台は新政府に恭順したために榎本、大鳥らと新たな政権を作るために蝦夷へ向かう。 蝦夷にて、旧幕府軍は五稜郭と松前城を落とし、函館政府を樹立させる。しかし松前藩攻略の際、榎本率いる海軍の主力艦・開陽丸が沈没。当初海軍力で優っていた函館政府は制海権を失うという痛手を負う。さらに新政府がアメリカ建造の装甲艦・甲鉄を入手したことで戦力差を付けられてしまう。土方は雪解けと共に蝦夷攻略に乗り出した新政府軍の猛攻を退けるが、味方の大鳥たちに足を引っ張られる形で防衛は失敗。ついに新政府軍が五稜郭に迫った際、健に多摩にいる家族の元に向かうよう命令する。陸軍奉行並の役職を辞して単身で新政府軍に討ち入り、今は亡き新撰組隊士のことを思いながら死ぬ。
沖田総司 声 - 北都南 一番隊隊長。白河藩の禄が高くない足軽の家に生まれ、また長女でなかったために口減しとして試衛館に預けられる。若くして塾頭を務めるなど試衛館でも随一の剣客である。斎藤一とは親しく、「一ちゃん」と呼ぶ。 池田屋事件で不破数右衛門に手傷を負わせるが、戦いの途中で喀血。後に労咳であることが判明する。山南敬助が脱走した際には追跡し、介錯も務める。長州征伐の小倉口の戦いでは不破数右衛門と再戦し敗北する(「ChuSinGura46+1 -忠臣蔵46＋1- 武士の鼓動(A samurai's beat)」を参照)。 次第に労咳による療養で隊の役目から外れるようになる。大政奉還後の動乱でも大阪城で療養し、鳥羽・伏見の戦いには不参加。江戸では甲陽鎮撫隊に参加し、死に場所を探すような行動を取る近藤を止めるため勝負を挑むが喀血して敗北。涙ながらに江戸に帰る。 甲陽鎮撫隊が勝沼で敗北した後は五兵衛新田に潜伏した新撰組と別れ、千駄ヶ谷の植木屋に匿われるが、近藤が板橋刑場で斬首された約1か月、労咳でこの世を去る。 個別ルートでは千駄ヶ谷にやって来た健と療養生活を送る。健の看病により一時は体調が回復し、会津で戦う新撰組に合流しようとするが、江戸で官軍の兵士を斬った事が切っ掛けで中村半次郎に所在を知られる。健の不在中に半次郎の襲撃を受け、板橋で近藤が処刑された事を聞かされて対決。三段突きを見舞って追い詰めるも、続く四段突きを放つ直前に喀血し、半次郎に敗れる。帰宅した健に看取られながら死に、健は数年後の西南戦争で半次郎を討ち取って沖田の仇を取る。
斎藤一 声 - 藤咲ウサ 三番隊隊長。抜刀術の達人で無外流免許皆伝。左利き。江戸で旗本に奉公していた足軽の家に生まれる。旗本に乱暴されかけたために斬り殺し、京の聖徳太子流に師範代として匿われるも長続きせず江戸に帰還。金に困っていたため旧友の永倉を頼り、永倉の口利きで試衛館の食客となる。当初は沖田と折り合いが悪く反発し合ったが、やがて親しくなり「総ちゃん」と呼ぶようになる。 長州征伐の小倉口の戦いでは深海直刃に敗れる(「ChuSinGura46+1 -忠臣蔵46＋1- 武士の鼓動(A samurai's beat)」を参照)。伊東甲子太郎が結成した御陵衛士には間者として潜入し、御陵衛士の内部情報などを土方に伝える。 会津戦争では隊の中でも特に会津に肩入れし、白河口の戦いでは西郷頼母指揮のもと奮闘。母成峠の戦いでも前線で戦うが形勢は不利であり鶴ヶ城に撤退を余儀なくされる。土方が仙台へ向かって戦線から離脱した後も会津に残って戦い、会津藩が新政府に恭順してからも城外で戦い続けた。これらの経緯から会津との縁故は長く続き、明治になってからも松平容保の警護役を仰せつかるなど信頼を勝ち得る。東京に移住して警視庁に採用され、西南戦争を戦った。 個別ルートでは会津に残った健と共に会津戦争を戦う。奥羽越列藩同盟が会津を見限り、藩が降伏してからも佐川官兵衛と合流して戦おうとする。健の静止で佐川と共に降伏し、以降高田藩で謹慎となる。健が官軍の兵に咄嗟に語った許嫁という嘘を本気にし、高田藩では同じ長屋で同居する。やがて土方が蝦夷で戦っていることを知ると、合流するために健と共に脱走。道中坂本龍馬の復讐を狙う岡田以蔵に襲われるも、下手人は薩摩だと打ち明けて退ける。青森から蝦夷に渡る手筈であったが間に合わず、港から函館が焼け落ちる光景を目撃し、土方が死んだことを悟る。 しばらく青森に潜伏していたが、旧会津藩士たちが斗南藩に転封されたことを知り、佐川を訪ねる。斗南藩に身を落ちつけた斎藤と健はそこで数年過ごすが、薩摩藩の不穏な動きを察知した新政府が佐川を警視庁に雇い入れた際に共についていく。江戸では容保が仲人を務めて健と結婚。西南戦争では佐川と共に奮闘する。 後年、斎藤と岡田以蔵が大久保一蔵(利通)を暗殺。警視庁を勤め上げた後は東京女子高等師範学校に住み込みで勤務。健と余生を過ごした後畳の上で天寿を全うしたと語られる。
永倉新八 声 - 沢澤砂羽 二番隊隊長。松前藩江戸定府取次役の娘として生まれ江戸で育つ。撃剣館で神道無念流を学び、免許皆伝の腕前。脱藩して剣術修行を行う中で天然理心流の噂を聞きつけて試衛館を訪ね、やがて食客となる。 隊の中では原田と特に親しい。また、彼氏が欲しいと公言するなど恋に奔放であり、土方が健を連れてきた際には猛アピールするなど当初から健に好意的であった。以後も健への好意を振りまき、何かと行動を共にしようとする。試衛館時代の面々が芹沢を警戒する中、神道無念流の同門であるために唯一好意的に接するなど独自の一面も持つ。 池田屋事件では先陣として斬り込み、左手を負傷する。土方が取り決めた厳しい法度により隊士の切腹などが目立つと異を唱え、度々意見がぶつかる。油小路事件では健、原田と共に御陵衛士を粛清。藤堂を看取る。 大政奉還に端を発した鳥羽・伏見の戦いが勃発すると二番隊を率いて奮戦。薩長が布陣する御香宮神社に迫るも二番隊隊士をほとんど失う痛手を負う。新撰組は江戸に退転し、甲陽鎮撫隊として甲州勝沼の戦いに参加することになるが、この時期を境に近藤と意見が対立することが目立つようになる。原田と共に会津に合流するよう近藤に提案するが、家臣となることを打診されたことに反発。原田と共に新撰組を脱退して靖兵隊を結成する。靖兵隊は北関東を抗戦するも、やがて会津は降伏してしまう。後年は新撰組の名誉回復の活動を行っていることが語られる。 個別ルートでは健が靖兵隊に参加する。健を隊長に据えて会津方面に進軍するが、道中で原田が板橋に捕らわれた近藤を救うために離脱してしまう。会津戦争の終結後、東京の長屋で健と同居。仕立て屋を開いて原田を追うもののその行方はようとして知れず、捜索は進展しない。東京暮らしの中、神社の境内で捨て子を拾い、新之助と名付けて健と共に面倒を見るようになる。仕立て屋の仕事をしながら新之助に読み書きや行儀を教えて厳しく躾けるが、実の子のようにかわいがる。 大石から原田が上野戦争で戦死した可能性が高いと聞かされると友人の死を受け入れて捜索を取りやめる。新之助を養子に迎えようと考えていた矢先に本当の母親が現れ、当初は反発するが新之助を返すことに決める。 新之助と別れた後、実家の母親が訪ねて来て帰藩するよう求められる。さらに函館で旧幕府軍が降伏したと報道され、同時に中村半次郎に襲撃される。健と二人がかりで対峙したために追い返すが、潜伏場所を知られたため長屋を出る。永倉の母の計らいで健が藩医の養子になり、永倉が健に嫁ぐ形で官軍の目を欺く。 後年、夫婦となった永倉と健は近藤の供養塔の建立、新撰組の名誉回復のために奔走する。
山南敬助 声 - 三代眞子 総長。仙台藩出身。愛称は「サンナンさん」。人を斬った後は興奮して自慰行為に耽る癖がある。極めて優秀であったため藩校から出て昌平坂学問所でも学ぶ。同時に小野派一刀流の免許皆伝を収めた後に北辰一刀流千葉道場の門人となる。実践的な天然理心流の噂を聞きつけて近藤に挑み、その後は近藤の人柄に惹かれて試衛館の食客となる。清川八郎の浪士組結成の話を近藤に紹介したのは山南である。 大阪で勝海舟を襲撃した不逞浪士を取り締まる際に負傷して剣を振れなくなる。禁門の変の後で隊に加入した伊東甲子太郎の真意を探るため、敢えてその志に賛同することで懐に入り込む。土方とは表向きには対立しているのを装い、密かに伊東の動向を報告する。伊東が隊を乗っ取るために薩摩と接触。山南は薩摩からの圧力により会津藩の重臣たちから近藤を暗殺するよう命令される。そのため近藤の命を救うために敢えて隊を脱走し、追跡して来た健と沖田にわざと捕まり、法度により切腹したことで伊東と薩摩の目論見を挫く。山南の死は隊士たちに深い影を落とした。 個別ルートでは健の説得により屯所に戻らず多摩に向かう。途中の宿で健に伊東と薩摩の策略で近藤の暗殺を依頼されたことを告白し、文で土方たちにも同じことを知らせる。健と山南は道中、物取りに襲われる庄内藩・本間氏の本間光輝を救い懇意となる。本間の紹介で藩校の致道館に案内された健は山南を助教として雇ってもらえるよう依頼。本間は家老の許しを得て山南を致道館の助教として、健を剣術指南として雇う。 致道館の助教として数年平穏に過ごした健と山南だが、京では鳥羽・伏見の戦いが勃発し、情勢不安となる。やがて幕府の徳川慶喜は敵に恭順し、新政府が発足。新政府側の薩摩は次の矛先として会津を狙い、江戸で新徴組を擁していた庄内藩も朝敵として狙われることになる。 会津戦争で数年ぶりに土方と再会した健と山南は近藤や沖田が死んだことを聞かされ、同時に会津が降伏した際には庄内藩も恭順するよう助言される。土方の助言通りに庄内藩主の酒井忠篤は新政府に恭順し、山南が行った大久保利通との交渉も功を奏して庄内藩は減俸で許される。健と山南はそのまま庄内(後に山形県)で余生を過ごす。
藤堂平助 声 - 飴川紫乃 八番隊隊長。津藩藩主・藤堂高猷の落胤。伊東大蔵の門弟として北辰一刀流を学び、目録を得る。落胤であるものの母と二人暮らしのため裕福ではなく、稽古料を払えずに同門の門弟たちから暴行を受けていたところを近藤に救われる。やがて近藤や試衛館の面々の人柄に惹かれ、伊東の許しを得て試衛館の食客となる。 当初、健の入隊には反対しており、ひときわ手厳しく接していた。健が平野国臣の一件で命令違反をした際には隊を追い出すという土方に同調し、正式に隊士として認める試験として健と勝負することになる。勝負では稽古を始めて日の浅い健と引き分け、この一件で健を認めるようになる。 池田屋事件では先陣として斬り込み、額を斬られて負傷する。禁門の変の後、江戸で大規模に隊士を募った際にはかつての師である伊東大蔵こと伊東甲子太郎の一派を新撰組に加えた。伊東と近藤の間で揺れ、伊東が御陵衛士として隊から分離した際には伊東に付いていく。 新撰組に残った伊東側の間者に脱退することを許可せず、大石鍬次郎が斬ったと聞かされた際には怒りを露にする。後に油小路事件と呼ばれる事件では健が斬った伊東の遺体を回収するために御陵衛士屯所から出動、かつての仲間であった新撰組隊士らと戦闘になる。藤堂の命を奪うことを躊躇った健ら新撰組隊士たちは密かに藤堂を救うために乱戦に乗じて逃がそうとするが、何も知らない平隊士に死角から斬られてしまい、健の腕の中で息絶える。 個別ルートでは油小路事件の際に健と共に離脱。伊東が当初から新撰組を裏切っていたこと聞かされて落ち込むが、大石が藤堂を斬るために乱入し、健が負傷する。河合の手引きで大阪に潜伏し、近藤が加納鷲雄に狙撃されたことを知る。鳥羽・伏見の戦いでは健と共に高浜台場に布陣する津藩に合流するが、父の高猷候は旧幕府側の楠葉台場を砲撃。高浜台場が新撰組に襲撃されて高猷候は撤退するが、娘の平助を連れ去ってしまう。官軍側についた高猷候により幽閉されていたが、江戸に向かった新撰組と合流するため健と共に出立。甲州勝沼の戦いで近藤らと再会し、先駆けおよび殿を勤めて近藤たちを逃がす。旧幕府軍を追いかけ、日光東照宮に籠城した大鳥圭介を会津にいる土方と合流するよう説得した後、板垣退助の隊に捕縛される。藤堂と健は別々の場所で謹慎させられ、戊辰戦争終結後に釈放される。江戸で健や河合と再会し、横浜で事業を起こしたことが語られる。
原田左之助 声 - 秋野花 十番隊隊長。愛称は「さのじ」。大石からは「ちゃのじ」と呼ばれる。伊予国松山藩出身で中間。宝蔵院流の免許皆伝の腕前。上役と諍いを起こし、切腹の作法を知らぬと言われたために本当に切りかけた。そのため腹部に刀傷がある。脱藩して試衛館に居座り、食客となる。 芹沢一派の暗殺に始まり、禁門の変、池田屋事件など新撰組の荒事に多く参加する。近江屋事件で坂本龍馬が暗殺された事件では薩摩および御陵衛士の策略で濡れ衣を着せられる。 鳥羽・伏見の戦いで敗退後、江戸で甲陽鎮撫隊として甲州勝沼の戦いに参加するも再び敗走。永倉と共に会津に合流するよう近藤に提案するが、家臣となることを打診されたことに反発。永倉と共に新撰組を脱退する。 永倉と靖兵隊を結成して会津に向かうが、道中で尾形と再会し、近藤が新政府軍に投降したことを知ると単身江戸に戻って近藤奪還を目指す。彰義隊と合流して上野戦争に参加した後安否が分からなくなる。
井上源三郎 声 - 桃山いおん 六番隊隊長。八王子千人同心の家に生まれる。愛称は「源さん」。試衛館で近藤、沖田らと天然理心流を学び免許皆伝となる。試衛館の面々を影で支える縁の下の力持ちのような役割を担い、芹沢もその影響力を認めていた。 鳥羽・伏見の戦いでは錦の御旗によって淀・千両松に後退。敵軍に御陵衛士の残党がいることを知り、激怒して斬り込んだ土方を庇って銃弾を受ける。長円寺に搬送されるも骸を埋めてほしいと言い残して息絶える。
芹沢鴨 声 - 神代岬 筆頭局長。水戸藩出身で脱藩浪士。神道無念流の免許皆伝。玉造組という尊王攘夷の結社に参加し、桜田門外の変として知られる井伊直弼暗殺計画に関与する。芹沢は第二陣に加わっていたため暗殺の実行犯とはならず、更なる攘夷実行のために金策に奔走。しかし金策中、潮来の商家を斬り捨てたことで江戸の獄に入れられてしまう。人斬りのため死罪を宣告されるが、清川八郎が立案した浪士組に参加することと引き換えに赦免される。清川が浪士組を攘夷運動に鞍替えさせることを聞くと近藤と共に京に残ることを選び、壬生浪士組の筆頭局長として会津藩お預かりの身分となる。 極めて苛烈な性格であり、浪士組として京に上洛する道中でも近藤が芹沢の宿を手配し忘れた腹いせに本庄宿の宿場で巨大な篝火を焚くなどの騒動を起こす。また、会津から給金が出ないのを口実に京や大阪の商家から金子の押し借りを行う。大阪奉行所からの依頼で大阪に出張した際には小野川部屋の力士と諍いを起こして鉄扇で殴りつけ、仕返しにやって来た力士たちを斬る。壬生浪士組を騙って商家から金子を騙し取った植村長兵衛という不逞浪士が現れると、酒で手懐けた新人隊士たちを使って捕縛。屯所の土蔵に近藤たちを集めて目の前で惨殺する。 植村の首を千本通に梟首して不逞浪士たちを威嚇すると、水口藩の公用方が会津藩に苦情を入れてくる。芹沢はその公用方を捕縛するよう健、永倉、原田、井上に命令するが、井上は機転を利かせて詫び状を貰うことで事態を収拾しようとする。だが水口藩は藩の名誉のために詫び状を返却するよう要求。芹沢はこれを認めるものの返却はしかるべき場所で行うべきだと主張し、水口藩は詫びとして島原の角屋を宴席会場とすることを約束する。取り決め通り角屋にて詫び状の返却を行うが、芹沢を恐れた芸子たちが出てこないことを知ると激昂。主人を脅迫し、七日間の営業停止を申し付けた挙句に店を破壊する。 さらに勤王派と通じていた豪商の大和屋を大筒で砲撃。御所の間近であるにもかかわらず火を放つという暴挙に出るが、実はこれは長州藩の大和行幸を察知した会津の重臣が容保に内密で芹沢に依頼したものだった。これにより会津は交代予定の兵を京に留めて八月十八日の政変で長州を締め出す。しかし度重なる狼藉行為から松平容保は近藤と土方に芹沢を討つよう命じることになる。 芹沢は近藤に逃亡を勧められるが拒否。近藤らは角屋で酒宴を開き、芹沢が無人の屯所に戻ったところを土方、沖田、斎藤、山南、原田、藤堂の六名で討ち取る計画を立てる。実行当夜、芹沢は見張りおよび後衛役の斎藤と藤堂を除いた精鋭四名相手に善戦するが、戦いに鞘が巻き込まれて斬られてしまう。鞘が倒れている現場を目撃した健は我を失い、玉の力を使って芹沢を斬る。最期は健に滅多刺しにされて絶命した。
新見錦 声 - 橘まお 副長。芹沢と同じく水戸藩脱藩浪士。神道無念流の免許皆伝。試衛館の面々とは度々対立する。長州の間者であった佐々木を斬ったほか、勤王派を支援した大和屋焼き討ちでも指揮を執るなど芹沢の腹心として暗躍。 会津が芹沢派を排除しようと動き出した際には事前に察知、芹沢の指示でわざと水戸藩士に喧嘩を吹っ掛けて手傷を負わせ、水戸藩本陣の本圀寺に拘留される。この事は水戸藩から会津藩によって伝えられ、同門の永倉を除いた土方ほか腕利きの隊士たちが身柄を引き取る。最期は祇園の揚屋で土方に粛清された。
松原忠司 声 - 杉原茉莉 四番隊隊長。播磨国小野藩藩士。関口流柔術の師範。慈悲深い性格で斬った長州藩士の妹に銭をやるなど面倒を見ていたが、伊東甲子太郎の策略で服部武雄に暗殺される。表向きは心中したことになった。
尾形俊太郎 声 - 杏子御津 五番隊隊長。肥後国熊本藩出身。剣は不得手だが国学を学んでいた文人。新撰組が勢いを落とす戊辰戦争を会津戦争まで隊士として戦うが、会津から離脱して後年は故郷の熊本に帰ったと伝えられる。
島田魁 声 - 萌花ちょこ 諸士調役兼監察。美濃国出身で心形刀流免許皆伝。永倉が江戸坪内道場で師範代をしていた時の弟子で、その縁で新撰組に入隊する。極度の甘党かつ大食いで一人でぜんざいを二十杯食べる。 函館戦争まで戦い抜いた数少ない隊士であり、戦後は京でレモネード屋を営むなどしていた。
山崎丞 声 - 藤森ゆき奈 諸士調役兼監察。摂津国大阪の医者の家に生まれたため医術の心得がある。隠密行動を得意とするほか情報収集などにも長けており、近藤や土方に重用された。怪我をした隊士の治療を行うことも多く隊士たちからの信頼も篤かったが、鳥羽・伏見の戦いでは淀・千両松で銃撃を受けて重症を負う。新撰組が大阪城から江戸に退転する船上で息絶え、丁重に水葬された。
河合耆三郎 声 - あじ秋刀魚 勘定方。播磨国高砂出身。八月十八日の政変後に隊に加わる。実家が蔵元であるために勘定方を任されたが、伊東甲子太郎の腹心である服部武雄の策略により長州征討のための広島偵察で帳簿に残さない金子を用立てるよう要求され従ってしまう。この件が土方に露見して実家に頼んで不足分を穴埋めするよう命じられるが、期日までに金子を用立てることができなかったために切腹を申し付けられる。直前に健に斬りかかるが返り討ちに遭い死亡。実は死んでおらず、土方と健の策により豚の血で死んだように偽装していたことが藤堂平助ルートで判明する。
大石鍬次郎 声 - 今谷皆美 諸士調役兼監察。近藤らとは同郷の武州多摩出身で天然理心流を学んでいた。近藤とは旧知。おじゃがという独特な口癖があるほか、健をご主人様と呼ぶ。 隊長格に匹敵するほどの実力者で粛清や介錯に関与。御陵衛士の間者たちが近藤を斬ろうと目論んだ際も一人で数人を斬り殺す。 戊辰戦争が勃発すると他の隊士たちと共に江戸に下る。新撰組が流山で包囲された後は会津に合流することが出来ず、江戸で逃亡生活を送っていた。 永倉新八ルートでは近藤が官軍に投降した後、江戸に潜伏している最中に健と再会。原田の安否を伝える。 藤堂平助ルートでは油小路事件の後、藤堂を庇い立てする健を誤って斬ってしまう。
酒井兵庫 声 - 蒼原千佳 会計方。容姿が近藤に似ている。金に困って原田から盗みを働いた際に近藤に救われ、入隊を願い出る。切腹した隊士の死体を処理する役目に従事するが脱走。追跡してきた健に逃がされる。 近藤勇ルートでは流山で新政府軍に包囲された近藤を救うため影武者として身代わりになる。