Kościół poświęcono 1 listopada 1928 roku. Dzień później ulicami miasta przeszedł wielotysięczny pochód wiernych i przedstawiciele 127 organizacji trasą z kościoła św. Jana do nowo wybudowanej świątyni. Następnie zwołane Zgromadzenie Parafialne św. Jana które dokonało podziału administracyjnego macierzystej jednostki oraz wyboru proboszcza-administratora, został nim ks. Julius Dietrich. Następnie pierwsze zgromadzenie parafian św. Mateusza samodzielnie dokonało wyboru proboszcza. Funkcję tę powierzono ks. Adolfowi Löfflerowi. Od roku 1930 w pracy pomagał mu ks. Gustaw Berndt, który w 1935 r., został II proboszczem. Od 1937 roku parafia posiadała dodatkowo dwóch wikarych bracii Harego i Gerhardta RichterówHenryk Czembor, Dzieje parafii luterańskich w Łodzi do 1939 roku, [w:] Przeszłość przyszłości. Z dziejów luteranizmu w Łodzi i regionie, red. ks. B. Milerski, K. Woźniak, Łódź 1998..
W latach 30. XX wieku w ramach parafii działo kilka organizacji o róźnym charakterze. Przede wszystkim należały do nich stowarzyszenia śpiewacze takie jak np. Cantate, Eol, Zoar, Kościelne Towarzystwo Śpiewacze, Ewangelicko-Luterański Chór Kościelny „Chojny” (założony 2 marca 1936).