Regulacja Reakcja ma ujemny potencjał zamiany energii swobodnej, podobnie jak dwie inne w glikolizie. Te trzy reakcje – fosforylacja glukozy, fosforylacja fruktozo-6-fosforanu oraz odłączenie grupy fosforanowej z fosfoenolopirogronianu – regulują ogólną aktywność szlaku glikolitycznego, i są generalnie nieodwracalne w warunkach fizjologicznych.
Aktywność kinazy pirogronianowej jest regulowana przez:
substrat, fosfoenolopirogronian oraz fruktozo-1,6-bisfosforan, intermediat w procesie glikolizy; dlatego też, glikoliza przebiega szybciej, gdy jest obecna większa ilość substratu ilość ATP, który jest inhibitorem allosterycznym; podobnie przebiega regulacja w fosfofruktokinazie I acetylo-CoA (aktywator allosteryczny), podwyższony poziom acetylo~S-CoA wskazuje na potrzebę wzmożenia syntezy szczawiooctanu alaninę, ujemny modulator allosteryczny.