Swoje dzieła tworzył w Wenecji, gdzie studiował dzieła Tycjana i Tintoretta, stając się obok nich najwybitniejszym twórcą nokturnów, oraz w ośrodkach północno-wschodniego regionu Wenecji Euganejskiej. Malował głównie obrazy rodzajowe o tematyce wiejskiej i religijnej z motywami wiejskimi i pasterskimi – Pokłon pasterzy (Musee des beaux Arts w Chambéry), Wypędzenie przekupniów ze świątyni (1568–1569 Prado, Madryt). Malował również sceny mitologiczne i portrety. Założył pracownię warsztatu malarskiego, w której pracowali jego czterej synowie Francesco Bassano (1549–1592), Girolamo (1566–1621), Giovanni Battista (1553–1613) i Leandro (1557–1622). W połowie XVI wieku namalował serię obrazów ołtarzowych w Bassano, Treviso, Padwie i Belluno.
Wybrane obrazy Obraz Data Kolekcja GrafikaWieczerza w Emaus olej na płótnie 102x144 cm 1537–1538Cittadella90pxChrystus dźwigający krzyż olej na płótnie 94 x 114 cm 1550–1555Muzeum Sztuk Pięknych w Budapeszcie90pxOstatnia wieczerza olej na płótnie 168 × 270 cm 1546Galeria Borghese, Rzym90pxTrzej magowie olej na desce 92,3 x 117,5 cm1560–1565Muzeum Historii Sztuki w Wiedniu90pxŚwięty Hieronim olej na płótnie 119 x 154 cmok. 1560Gallerie dell’Accademia, WenecjaŚcięcie św. Jana Chrzciciela olej na płótnie, 132 × 127 cm II poł.