Nowy odcinek korzysta z możliwości DS (zwłaszcza ekranu dotykowego) w kilku przypadkach, jak opryskiwanie luminolem, aby zlokalizować plamy krwi na miejscu przestępstwa, pobieranie odcisków palców lub trójwymiarowy analizowanie dowodów.
Fabuła Rozdział otwierający serię opowiada o pierwszej rozprawie adwokata Phoenixa Wrighta pod czujnym okiem Mii Fey, podczas której ma za zadanie wybronić swego znajomego z dzieciństwa Larry’ego Butza od zarzutu zabójstwa. Jednak już podczas drugiej rozprawy, Mia zostaje zamordowana z powodu odkrycia szantażu korporacyjnego, a jej młodsza siostra Maya zostaje oskarżona o zabójstwo, ponieważ jej imię znalazło się w materiałach dowodowych. Broniąc jej Phoenix spotyka innego przyjaciela z dzieciństwa, Milesa Edgewortha, który jest prokuratorem w sprawie Mai i dzięki swoim umiejętnościom został nazwany „geniuszem”. Kiedy sąd ogłosił, że Maya jest niewinna, zostaje ona asystentką Phoenixa w następnych rozprawach. Dzięki jej zdolnościom Phoenix jest w stanie kontaktować się z duchem Mii, która pomaga mu w krytycznych sytuacjach.