Zróżnicowanie fizycznogeograficzne Podlasie Południowe leży na pograniczu dwóch dużych jednostek regionalizacji fizycznogeograficznej Europy. Północna i zachodnia jego część, makroregion Nizina Południowopodlaska, znajduje się w granicach prowincji Niż Środkowoeuropejski megaregionu Pozaalpejskiej Europy Środkowej, natomiast część południowo-wschodnia, Polesie Zachodnie – w granicach prowincji Polesie należącej do megaregionu Niżu Wschodnioeuropejskiego. W części północnej przeważa krajobraz nizin falistych, zaś w południowej – równinnych. Część wschodnia posiada klimat umiarkowany ciepły przejściowy o cechach bardziej kontynentalnych niż w Dolinie Środkowej Wisły.
Podlasie Południowe nie jest krainą geograficzną, bowiem dzielą je zasadnicze granice fizycznogeograficzne.
Zasięg krainy Granice Podlasia Południowego wytyczają zasadniczo granice departamentu siedleckiego istniejącego w latach 1810–1816, następnie przekształconego w województwo podlaskie (1816–1837), a potem w gubernię podlaską (1837–1844). W większości granice te pokrywały się z gubernią siedlecką (1867–1918) oraz z diecezją podlaską (1818–1867 oraz 1918–1992).